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造成样本背景被染色原因是什么?

艾托金生物医药(苏州)有限公司2020-08-17

造成样本背景被染色原因与解决方案如下:


1、抗原修复过度;抗体浓度过高或孵育时间过长、孵育温度过高
解决方案:严格控制抗原修复时间;根据抗体说明书摸索出适宜的抗体浓度,或缩短抗体孵育时间、降低孵育温度。

2、清洗不充分
解决方案:增加清洗时间和次数。

3、显色时间过长
解决方案:显微镜下显色,控制显色强度。

4、切片样本中有组织坏死区
解决方案:忽略该部分染色,或重新取材。

5、切片样本有褶皱、刀痕或撕裂
解决方案:重新切片,确保待测组织切片平整、完整。

6、组织切片出现干片
解决方案:染色过程中应全程保持切片湿润,禁止干片。

7、内源性过氧化物酶显色(通常发生在红细胞、炎症细胞、坏死组织中)
解决方案:使用过氧化物酶阻断剂进行阻断;延长阻断时间;使用非过氧化物酶二抗检测系统。

8、内源性生物素显色(通常出现在高代谢组织样本中)
解决方案:使用非生物素二抗检测系统。